http://hdl.handle.net/10608/8522 2026-04-07T22:55:26Z http://hdl.handle.net/10608/8554 Activation de la réponse innée antivirale par des inhibiteurs de la biosynthèse des pyrimidines : Les surprises d’un criblage phénotypique Vidalain, Pierre-Olivier; Lucas-Hourani, Marianne; Helynck, Olivier; Tangy, Frédéric; Munier-Lehmann, Hélène Les virus à ARN sont responsables de maladies graves telles que la grippe, la dengue, l’hépatite C, la rougeole ou la bronchiolite des nourrissons. Ils représentent également une menace émergente en raison des échanges internationaux et des bouleversements écologiques liés aux activités humaines. Notre compréhension des mécanismes cellulaires qui contrôlent la réplication virale a fortement progressé ces dernières années, et il apparaît que des composés capables de cibler la cellule hôte, plutôt que le virus lui-même, pourraient inhiber un large éventail de virus à ARN. Ainsi, différents laboratoires privés et universitaires sont en quête de molécules stimulant la réponse antivirale innée des cellules hôtes. Une stratégie intéressante consiste à rechercher des molécules induisant l’expression des ISG (interferon-stimulated genes), lesquels constituent un vaste ensemble de gènes antiviraux activés en particulier par les interférons de type I. Pour atteindre cet objectif, nous avons mis au point un test phénotypique basé sur des cellules humaines transfectées avec un gène rapporteur luciférase sous contrôle d’un élément de réponse aux interférons (ISRE). Ce système a été utilisé pour cribler une chimiothèque d’environ 54 000 composés. Parmi les molécules sélectionnées, nous avons montré que le composé DD264 stimule la réponse immunitaire innée dans les cultures cellulaires, et présente une activité antivirale à large spectre. En recherchant la cible de ce composé, nous avons montré qu’il inhibe la voie de biosynthèse de novo des pyrimidines, et notamment la quatrième enzyme de cette voie métabolique, la dihydroorotate déshydrogénase (DHODH). Ainsi, nos résultats établissent de façon surprenante un lien fonctionnel nouveau entre la voie de biosynthèse des pyrimidines et la réponse innée antivirale.; RNA viruses are responsible for major human diseases such as flu, bronchitis, dengue, hepatitis C or measles. They also represent an emerging threat because of increased worldwide exchanges and human populations penetrating more and more natural ecosystems. Recent progresses in our understanding of cellular pathways controlling viral replication suggest that compounds targeting host cell functions, rather than the virus itself, could inhibit a large panel of RNA viruses. In particular, several academic laboratories and private companies are now seeking molecules that stimulate the host innate antiviral response. One appealing strategy is to identify molecules that induce the large cluster of antiviral genes known as Interferon-Stimulated Genes (ISGs). To reach this goal, we have developed a phenotypic assay based on human cells transfected with a luciferase reporter gene under control of an interferon-stimulated response element (ISRE). This system was used in a high-throughput screening of chemical libraries comprising around 54,000 compounds. Among validated hits, compound DD264 was shown to boost the innate immune response in cell cultures, and displayed a broad-spectrum antiviral activity. While deciphering its mode of action, DD264 was found to target the fourth enzyme of de novo pyrimidine biosynthesis, namely the dihydroorotate dehydrogenase (DHODH). Thus, our data unraveled a yet unsuspected link between pyrimidine biosynthesis and the innate antiviral response. 2015-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10608/8555 Chroniques génomiques - Encore le « gène du crime » ? Jordan, Bertrand A new genetic study focussing on the degree of violence in criminals and using both candidate gene and GWAS approaches finds statistically significant associations of extreme violent behaviour with low activity alleles of monoamine oxydase A (MAOA) and with the CD13 gene. However, the alleles implicated are common in the general population, thus they cannot be causal, and only represent potential indicators of increased risk. 2015-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10608/8552 PCR digitale en micro-compartiments : I. Détection sensible de séquences d’acides nucléiques rares Perez-Toralla, Karla; Pekin, Deniz; Bartolo, Jean-François; Garlan, Fanny; Nizard, Philippe; Laurent-Puig, Pierre; Baret, Jean-Christophe; Taly, Valérie La détection efficace d’altérations génétiques dans les domaines de la cancérologie, de la virologie ou du diagnostic prénatal requiert des niveaux de sensibilité et de spécificité hors de portée des technologies conventionnelles. En réalisant l’amplification de molécules d’ADN uniques dans des compartiments indépendants, la PCR digitale (dPCR) en systèmes microfluidiques permet de dépasser ces limitations et de suivre ces marqueurs dans les fluides biologiques. Après une présentation non exhaustive des technologies disponibles, cette revue présentera leur impact potentiel pour des applications biomédicales, notamment dans la prise en charge des patients atteints de cancers.; Polymerase chain reaction based techniques have been widely used in laboratory settings. Several applications in oncology, virology or prenatal diagnosis require highly sensitive detection methods, which cannot be achieved with conventional techniques. Digital PCR (dPCR) was developed from the association of PCR and limiting dilution procedures. It is based on the compartmentalization of DNA molecules in small volumes. Controlling the size and the content of each compartment is crucial to obtain a high sensitivity with a single molecule resolution. Microfluidics offers promising tools to isolate DNA fragments such as microdroplets, microchambers or microwells with volumes ranging from few picoliters to nanoliters. The review provides an overview of recent developments of microfluidics dPCR platforms and how this technology can influence the management of cancer patients. 2015-01-01T00:00:00Z http://hdl.handle.net/10608/8553 Synthèse orientée vers la diversité structurale pour explorer le vivant Wong, Yung-Sing La synthèse orientée vers la diversité structurale vise à combler des « espaces chimiques »  tridimensionnels laissés inoccupés par les chimiothèques traditionnelles. Grâce au développement de nouvelles stratégies de synthèse qui s’appuient sur les réactions divergentes, le chimiste est aujourd’hui capable, en seulement deux ou trois étapes de synthèse, de réaliser une telle chimiothèque qui assure l’obtention d’un nombre important de produits différents présentant qualitativement une grande diversité structurale. Nous présentons ici quelques exemples qui illustrent cette démarche vers plus de diversité et de complexité moléculaires, avec des applications concernant la découverte et l’optimisation de composés biologiquement actifs.; Structural diversity oriented synthesis aims to fulfill the unoccupied tridimensional “chemical space” gap left by traditional chemical libra-ries. Through the development of novel synthetic strategies relying on divergent reactions, chemist is now able to realize in only two or three steps such library that ensures the access of a large number of products having a good quality in term of structural diversity. A few examples are presented to illustrate how this can be done in the context of increasing molecular complexity and diversity devoted to the discovery and optimization of bioactive compounds. 2015-01-01T00:00:00Z