Les récepteurs couplés aux protéines G (RCPG) représentent une des plus grandes familles de récepteurs cellulaires de surface. Ils assurent la conversion de signaux extracellulaires de nature très diverse en signaux intracellulaires, conduisant à la réponse cellulaire et, in fine, à la réponse physiologique. Régulant la plupart des processus physiologiques, ils constituent de ce fait une cible médicamenteuse essentielle couvrant aujourd’hui environ 40 % du marché du médicament. Si les ligands/médicaments ciblant les RCPG représentent des molécules thérapeutiques efficaces, connaît-on réellement leur mode de fonctionnement ? L’apparition récente de nouveaux concepts en pharmacologie laisse quelque peu perplexe.

Pendant très longtemps, la pharmacologie classique des RCPG définissait la notion d’agonisme comme la capacité d’un ligand à déclencher l’activation simultanée de l’ensemble des voies de signalisation spécifiques de son récepteur (Figure 1A). Plus récemment, cette notion a laissé place au concept « d’agonisme biaisé », selon lequel des ligands sélectifs pour un même récepteur sont capables de sélectionner certaines voies de signalisation associées à ce récepteur [ 1] (Figure 1B) ; cette sélectivité est susceptible d’entraîner des effets physiologiques particuliers. Cette révolution pharmacologique ouvre ainsi la possibilité d’affiner les effets des médicaments ciblant les RCPG en créant des molécules spécifiques d’une voie de signalisation, permettant ainsi de diminuer les effets secondaires indésirables souvent associés [ 2].

Figure 1. Évolution du concept d’agonisme. A. Modèle 1 : définition classique d’un ligand agoniste (clefs universelles) d’un RCPG (porte A). Le ligand active simultanément toutes les voies de signalisation intracellulaires (1, 2, 3 et 4) associées au RCPG. B. Modèle 2 : le modèle classique a laissé place au concept d’agoniste biaisé, définissant le ligand agoniste comme capable de sélectionner uniquement l’activation de certaines voies de signalisation (1 et 3). C. Modèle 3 : les travaux de Saulière et al. [ 7] démontrent que certains agonistes sélectifs d’un RCPG activent des voies de signalisation jusque-là inconnues avec l’agoniste physiologique. Cette découverte démontre la grande plasticité des RCPG et ouvre la porte à la caractérisation d’une très grande diversité d’entités de ces récepteurs.

Figure 1. Évolution du concept d’agonisme. A. Modèle 1 : définition classique d’un ligand agoniste (clefs universelles) d’un RCPG (porte A). Le ligand active simultanément toutes les voies de signalisation intracellulaires (1, 2, 3 et 4) associées au RCPG. B. Modèle 2 : le modèle classique a laissé place au concept d’agoniste biaisé, définissant le ligand agoniste comme capable de sélectionner uniquement l’activation de certaines voies de signalisation (1 et 3). C. Modèle 3 : les travaux de Saulière et al. [ 7] démontrent que certains agonistes sélectifs d’un RCPG activent des voies de signalisation jusque-là inconnues avec l’agoniste physiologique. Cette découverte démontre la grande plasticité des RCPG et ouvre la porte à la caractérisation d’une très grande diversité d’entités de ces récepteurs.

Selon le concept d’agonisme biaisé, il apparaît que l’efficacité d’un ligand ne dépend plus d’un couple unique ligand-récepteur, mais d’un trinôme ligand-récepteur-effecteur, soulignant l’efficacité pluridimensionnelle des ligands [ 3]. L’identification des ligands agonistes biaisés pose alors la question du choix de l’effecteur dans les stratégies de criblage de ces molécules. La signalisation pléiotrope des RCPG n’est pas sans compliquer ce choix. Jusqu’à présent, et de façon quelque peu simpliste en raison des multiples voies de signalisation et de régulation associées à l’activation d’un RCPG, la signalisation des RCPG a été simplifiée selon un schéma divisé en voies dépendantes des protéines G hétérotrimériques, et voies indépendantes des protéines G mais dépendantes de la β-arrestine [ 4] (deux effecteurs proches du récepteur dans la membrane plasmique). De manière surprenante, jusqu’à présent on a décrit très peu de ligands biaisés mettant en jeu l’activation des protéines G par opposition à celle de la β-arrestine. C’est curieux puisque les protéines G constituent l’effecteur intracellulaire commun à toutes les familles de RCPG, et surtout l’étape initiale en réponse à la liaison d’un agoniste sur le récepteur et qui déclenche l’activation des voies de signalisation dans la cellule. Dans notre équipe, nous avons émis l’hypothèse que l’un des problèmes majeurs résidait dans l’absence d’essais sensibles et directs pour mesurer l’activation des protéines G [ 5].

La qualification d’agoniste biaisé pour un ligand de RCPG n’est pas sans faille puisqu’elle dépend uniquement de la mesure de l’activité des effecteurs intracellulaires associés à un récepteur. Une autre difficulté provient également de la faible efficacité des ligands biaisés nécessitant l’utilisation d’essais extrêmement sensibles pour leur identification.

Les RCPG sont capables d’interagir avec de multiples isoformes de protéines G, néanmoins aujourd’hui, aucun essai ne permet d’apprécier de manière sensible et directe l’activation individuelle de chacune de ces isoformes. Classiquement, l’activation directe des protéines G est mesurée uniquement par liaison du [³⁵S]-GTPγS sur des fractions membranaires de cellules. Mais elle reste très peu sensible (bruit de fond très élevé) et restreinte essentiellement à l’analyse de la famille Gi (inhibitrice) sans distinguer parmi les différentes isoformes constituant cette famille [5]. Une autre méthode plus largement utilisée est la mesure indirecte de l’activation des effecteurs de la protéine G (adénylate cyclase, phospholipase C, etc.) [5]. Elle représente aujourd’hui l’essai privilégié pour l’évaluation d’activité biaisée des ligands. Cependant, ces méthodes dépendent de l’amplification du signal cellulaire et ne sont pas adaptées à la mesure de signaux compartimentalisés dans la cellule. Par opposition, les essais mesurant l’activation de la β-arrestine sont plus fiables et basés sur la mesure de la translocation de cette protéine cytosolique au niveau du RCPG membranaire, soit par imagerie confocale en immunofluorescence, soit par des essais utilisant le transfert d’énergie par résonance (BRET [bioluminescence resonance energy transfer] ou FRET [fluorescence resonance energy transfer]), et mesurant l’interaction directe entre le récepteur et la β-arrestine [ 6]. Ces différences dans la sensibilité des essais pourraient ainsi rendre compte de la différence existant entre le nombre d’agonistes biaisés entre la voie β-arrestine et la voie des protéines G.

Nous avons développé récemment des sondes basées sur la technique BRET et la proximité entre la sous-unité Gα et Gγ qui, pour la première fois, permettent de mesurer l’activation directe de toutes les familles de protéines G (G_i/o, G_s, G_q/11, G_12/13) en temps réel et dans des cellules vivantes [7]. De façon étonnante, nous avons montré grâce à ces sondes que le populaire peptide synthétique SII dérivé de l’angiotensine II (AngII) et décrit comme un agoniste biaisé de la voie β-arrestine du récepteur angiotensine 1 (AT1) qui lie l’AngII [ 8], présentait des caractéristiques d’agoniste partiel pour l’activation des protéines G comparé à l’agoniste physiologique AngII. La surprise ne s’arrêtait pas là puisque, dans un second temps, nous avons validé l’implication des protéines G endogènes en mesurant l’activation de leurs effecteurs secondaires directs (adénylate cyclase, phospholipase C) ou, plus en aval, extracellular signal-related kinases 1/2 (Erk1/2), et démontré que les deux molécules SII et AngII activent le récepteur AT1 selon deux modes opératoires totalement différents, chacun impliquant les protéines G et la β-arrestine. Lorsque l’on analyse en BRET la conformation du complexe formé entre le récepteur AT1 et les protéines G, chacun des ligands stabilise une structure spécifique du complexe très probablement à l’origine d’une signalisation intracellulaire différente. Aussi, contrairement au dogme établi, le SII ne mime pas une partie de l’agoniste physiologique AngII, mais induit une nouvelle entité active du récepteur AT1 [7].

Il apparaît ainsi que des agonistes sélectifs d’un même récepteur sont capables de stabiliser le récepteur vers un mode de signalisation particulière, jusqu’alors inconnu en référence à l’agoniste physiologique (Figure 1C). Ces ligands permettent donc de créer de nouvelles entités pharmacologiques en utilisant un même récepteur. Cette découverte démontre la grande plasticité des RCPG et ouvre la porte à la caractérisation d’une très grande diversité d’entités de ces récepteurs. Elle pose aussi la question de l’existence réelle des agonistes biaisés. Chaque couple ligand-récepteur ne représente-il pas une entité pharmacologique unique ? Quelle est maintenant la relevance physiologique de chacune de ces entités récepteurs ? Dans le futur, la dissection des différentes voies de signalisation en aval du récepteur devrait permettre d’avancer dans cette réflexion. Elle nécessitera non plus une analyse unique de différents effecteurs telle que la préconisait le concept d’agonisme biaisé, mais plutôt la dissection des mécanismes moléculaires conduisant à l’activation de ces effecteurs (protéine G, β-arrestine). Par ailleurs, cette nouvelle vision indique que le choix de l’effecteur pour la caractérisation pharmacologique des ligands ne doit plus être cantonné aux effecteurs classiquement associés à un récepteur, mais étendu à un panel d’effecteurs beaucoup plus large.

L’auteur déclare n’avoir aucun lien d’intérêt concernant les données publiées dans cet article.