Parmi les facteurs d’initiation de la traduction, eIF4E fut le premier impliqué dans la transformation de cellules en culture. Plusieurs ARNm, activement traduits durant la croissance cellulaire et agissant dans la transformation, contiennent des structures secondaires dans leur extrémité 5’non-traduite (vascular endothelial growth factor A, cyclin D1, fibroblast growth factor 2, ornithine decarboxylase) [3]. La surexpression d’eIF4E aboutit à un dérèglement de la synthèse protéique et du fonctionnement cellulaire (pour revue, voir [3]) et, en particulier, à une augmentation de la traduction de ces ARNm. D’autres études suggèrent également qu’eIF4E serait susceptible de coopérer avec d’autres protéines transformantes telles que c-Myc et E1A [3, 5, 6] et que son expression serait particulièrement élevée dans plusieurs types de cancer (pour revue, voir [3]). De façon similaire, le complexe eIF4F est nécessaire au maintien de la croissance des cellules cancéreuses mammaires in vivo [ 7]. Enfin, d’autres facteurs déclencheurs tels qu’eIF4G, eIF4A et eIF3 jouent un rôle important dans l’oncogenèse [3]. Ce constat renforce l’idée qu’une augmentation de la synthèse protéique pourrait induire l’oncogenèse.

Les facteurs de croissance, les agents mitogènes et les hormones activent tous la voie PI3K/Akt/mTOR et la traduction cap-dépendante [ 8] (Figure 2). La PI3K (phosphatidyl-inositol-3-kinase) phosphoryle le phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate (PtdIns[4,5]P2) et produit le phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate (PtdIns[3,4,5]P3). Cette production de P3 entraîne l’activation de PDK1 (3’-phosphoinositide dependent kinase 1), qui à son tour active Akt, une serine/thréonine kinase de la famille cAMP-dependent protein kinase A/ protein kinase G/ protein kinase C (AGC). Cette activation est contrôlée par PTEN, une lipide-phosphatase qui déphosphoryle les P3 et les convertit en leur forme inactive P2. PTEN est également un gène suppresseur de tumeurs souvent muté dans nombre de cancers et de syndromes associés au cancer [ 9]. Le complexe TSC1/TSC2 possède une activité GTPasique inhibant Rheb, une GTPase de la famille de Ras. En phosphorylant TSC2, Akt inactive le complexe TSC1/TSC2 ce qui permet à Rheb d’activer mTOR (mammalian target of rapamycin), une serine/thréonine kinase de la famille des phosphatidylinositol kinase related protein kinase (PIKK) [ 10]), par un mécanisme encore indéterminé [9]. TSC1 et TSC2 sont également des gènes suppresseurs de tumeurs souvent mutés dans la sclérose tubéreuse, une pathologie caractérisée par l’émergence d’hamartomes (tumeurs bénignes), principalement dans le tube digestif [9]. Lorsque le ratio AMP/ATP est élevé, l’AMPK (kinase activée par l’AMP), senseur énergétique de la cellule, phosphoryle TSC2, ce qui augmente son activité et inhibe mTOR [9]. Enfin, les acides aminés et le glucose peuvent aussi activer directement mTOR [ 11].

Une fois activée, mTOR phosphoryle deux cibles majeures : les S6 kinases (S6K1 et 2) et les 4E-BP (eIF4E-binding proteins 1-3) [8] (Figure 2). L’hyperphosphorylation des 4E-BP (famille de trois protéines, 4E-BP1-3) diminue leur interaction avec eIF4E et stimule la traduction cap-dépendante (Figure 2). Les 4E-BP sont aussi d’importants régulateurs de la croissance cellulaire car la surexpression d’un mutant constitutivement actif de 4E-BP1, où les quatre sites de phosphorylation (Thr36, Thr45, Ser64 et Thr 69) sont mutés en alanines, diminue la progression en phase G1 et bloque la transformation induite par c-Myc [ 12]. Jusqu’à récemment, on pensait que la S6 kinase était absolument nécessaire à la traduction d’ARNm possédant une région riche en pyrimidines (TOP) dans leur partie non traduite (protéines ribosomiques eEF1a) [ 13]. Cette hypothèse a été réfutée en observant que chez les souris déficientes pour S6K1 et S6K2, la traduction des ARNm TOP est maintenue [ 14]. Cependant, la délétion de S6K1 et S6K2 mène à une réduction de la taille des souris, suggérant ainsi un nouveau rôle pour S6K dans la régulation de la croissance cellulaire [14].

mTOR permet l’intégration de nombreux signaux intra et extracellulaires et agit directement sur les cibles traductionnelles [8]. La rapamycine inhibe spécifiquement mTOR en se liant à son récepteur intracellulaire, la protéine FK506 binding protein-12 (FKBP12). Le complexe FKBP12/rapamycine ainsi formé inhibe l’activité kinase de mTOR [8]. Le développement d’analogues structuraux de la rapamycine, CCI-779 (Wyeth-Ayerst), RAD001 (Novartis) et AP23573 (Ariad Pharmaceuticals) soulève un intérêt considérable. Ces analogues présentent, en effet, une puissante activité anti-proliférative dans plusieurs types de cancer : tumeurs pulmonaires, cérébrales, mammaires, coliques, leucémies et lymphomes. Plusieurs tests cliniques faisant appel à ces analogues sont actuellement en cours de validation [ 15, 16].

mTOR fait partie d’un large complexe protéique comprenant trois partenaires identifiés : raptor [ 17, 18], GβL [ 19] et rictor [ 20, 21] (Figure 2). Raptor (regulatory associated protein of mTOR, Kog1, chez la levure), qui interagit directement avec 4E-BP et S6K grâce à leur motif TOS (séquence d’acides aminés : FEMDI et FDIDL, respectivement), est nécessaire à la phosphorylation de ces deux protéines par mTOR [ 22]. L’interaction raptor/mTOR est sensible à la disponibilité en nutriments et dépend d’un autre partenaire, GβL (Lst8p chez la levure) [19]. Indépendamment de raptor, GβL interagit directement avec le domaine kinase de mTOR pour augmenter son activité. Enfin, rictor (rapamycin-insensitive companion of mTOR ou mAVO3) intervient dans les réarrangements du cytosquelette [20, 21]. Rictor et raptor délimitent deux complexes mTOR : alors que l’activité du complexe mTOR/GβL/raptor (mTORC1) est inhibée par la rapamycine, le complexe mTOR/rictor (mTORC2) y est insensible [20, 21] (Figure 2). De nouvelles données font intervenir le complexe mTOR/rictor dans la phosphorylation et l’activation d’Akt [ 23]. Ainsi, rictor pourrait être une cible thérapeutique dans le traitement des cancers associés à la voie PI3K/Akt/mTOR [23].

La différenciation adipocytaire est un processus complexe, chronologiquement orchestré par les facteurs de transcription C/EBP et PPARγ [ 24]. Dans un premier temps survient un arrêt de la prolifération des préadipocytes, puis C/EBPβ et d sont exprimés de façon transitoire. Ces événements précoces sont suivis de l’expression de C/EBPα et PPARγ qui activent l’expression de la plupart des gènes caractérisant le phénotype adipocytaire [24] (Figure 3).

Le rôle de mTOR dans l’adipogenèse a été mis en évidence par l’utilisation de la rapamycine. Cette dernière réduit la différenciation de préadipocytes humains [ 25]. L’effet de la rapamycine est indépendant de C/EBPβ et C/EBPd, mais il est associé à une réduction de l’expression de C/EBPα et PPARγ. De plus, la rapamycine réduit l’activité transcriptionnelle de PPARγ et perturbe la boucle de rétrocontrôle entre PPARγ et C/EBPα [ 26] (Figure 3), ce qui suggère une modulation transcriptionnelle plutôt que traductionnelle de l’adipogenèse par la rapamycine. Les rôles précis de 4E-BP1 et S6K dans le processus d’adipogenèse sont encore mal connus. La rapamycine inhibe totalement la phosphorylation de S6K, mais partiellement la différenciation adipocytaire de cellules 3T3-L1 [ 27] et l’expression d’un mutant constitutivement actif de S6K n’est pas capable de rétablir ce processus [27]. À l’inverse, la rapamycine n’inhibe que partiellement la phosphorylation de 4E-BP1 [27], suggérant que 4E-BP1 pourrait jouer un rôle plus important que S6K dans la différenciation adipocytaire. Il s’avère que les souris 4E-BP1^−/− présentent une masse adipeuse réduite du fait d’une dépense énergétique accrue [ 28], associée à une conversion du tissu adipeux blanc en tissu adipeux brun, détectée par l’expression d’UCP-1 (uncoupling protein-1). De plus, PGC-1 (PPARγ co-activator-1), facteur de transcription impliqué dans la biogenèse mitochondriale et la thermogenèse, est également surexprimé dans le tissu adipeux blanc des souris 4E-BP1^−/− . L’ensemble de ces données suggère que le contrôle de l’adipogenèse par mTOR impliquerait eIF4E/4E-BP1 plutôt que S6K. Ces données accordent également un rôle complexe à la voie mTOR par laquelle l’activation de la voie eIF4E/4E-BP1 ainsi que l’activité kinase de mTOR sont toutes deux nécessaires à l’initiation et au développement du processus adipogénique.

Les conditions physiologiques favorisant une suractivation de la voie mTOR telles que l’hyperinsulinémie, l’excès chronique de nutriments et l’obésité, pourraient accroître l’insulino-résistance, cause de diverses maladies métaboliques, notamment le diabète de type 2 [ 29]. Une étude pionnière a montré qu’une exposition prolongée à l’insuline réduisait non seulement la mobilité éléctrophorétique, mais également le niveau protéique d’IRS-1 (insulin receptor substrate-1), protéine clé dans le relais des effets pléiotropiques de l’insuline [ 30]. Cette réduction démontrait des effets sur la transduction du signal puisque l’activation d’Akt, initialement stimulée, était réduite après une exposition prolongée à l’insuline. De plus, l’utilisation d’inhibiteurs de la voie PI3K/mTOR bloquait cet effet de l’insuline, tandis que l’utilisation d’une forme constitutivement active de la PI3K reproduisait les effets d’une exposition prolongée à l’insuline [30]. L’ensemble de ces données suggérait qu’un mécanisme mTOR-dépendant était la cause de l’inhibition de la voie PI3K/Akt via une boucle de rétrocontrôle négatif dont IRS-1 était la cible (Figure 2).

Récemment, le lien entre mTOR et le développement de l’insulino-résistance a été clarifié [29, 31, 32]. Les activités mTOR et S6K sont accrues dans le foie et le muscle squelettique de rats en régime gras [32]. Cette augmentation de l’activité mTOR est associée à une augmentation de la phosphorylation inhibitrice d’IRS-1 (Ser307, Ser636/639) et d’une inhibition d’Akt. À l’inverse, l’inhibition de mTOR permet de restaurer les activités PI3K et Akt [32]. Les délétions de TSC1 ou TSC2 sont connues pour engendrer une suractivation de la voie mTOR et de S6K [29, 31]. De façon similaire au régime gras, la suractivation de mTOR dans ces modèles réduisait l’activation d’Akt en réponse à l’insuline, à PDGF et au sérum [29, 31]. Cette inhibition de la voie Akt pouvait s’expliquer par une inhibition de l’expression d’IRS-1 [29]. Il est ici remarquable que la délétion de S6K1 corrige ce phénotype en restaurant l’activation d’Akt et l’expression d’IRS-1, suggérant que S6K1 maîtrise le rétrocontrôle négatif de la voie mTOR sur la voie PI3K/Akt [29] (Figure 2).

Il restait à déterminer si une suractivation de la voie mTOR/S6K pouvait contribuer au développement de l’insulino-résistance in vivo. L’étude de la souris S6K1^−/− conforte l’idée selon laquelle S6K1 intervient dans l’inhibition d’IRS-1 [ 33]. Les souris témoins sous régime gras présentaient une phosphorylation accrue de S6K1 et une réduction de la phosphorylation d’Akt dans le muscle, le foie et le tissu adipeux [33]. De plus, comparées aux souris S6K1^−/− , les souris témoins obèses présentaient une augmentation de la phosphorylation d’IRS-1 sur les résidus Ser307 et Ser636/639 dans le tissu adipeux, sites associés à l’insulino-résistance [ 34]. De la même façon, la phosphorylation de ces sites et celle de S6K1 étaient accrues chez des souris ob/ob et K/KA^y , deux modèles d’obésité génétique [33].