Les cellules endothéliales synthétisent et sécrètent plusieurs substances vasodilatatrices ou vasoconstrictrices en réponse à des stimulus biochimiques (peptides, neuroamines…) ou à des stimulus physiques (force de cisaillement, pression). Au cours des 25 dernières années, deux vasodilatateurs d’origine endothéliale ont été identifiés et caractérisés, la prostacycline synthétisée par la cyclo-oxygénase à partir de l’acide arachidonique, et le monoxyde d’azote (NO) produit par la NO-synthase à partir de la L-arginine [ 1]. Cependant, la production de prostacycline ou de NO ne peut expliquer l’ensemble des relaxations (ou vasodilatations) dépendantes de l’endothélium. En présence d’inhibiteurs de cyclo-oxygénase et de NO-synthase, un mécanisme additionnel responsable d’une vasorelaxation, toujours dépendante de l’endothélium, est observé dans de nombreuses artères de différentes espèces, y compris chez l’homme (Figure 1). Ce mécanisme implique l’hyperpolarisation des cellules musculaires lisses et il est particulièrement prépondérant dans la circulation coronaire et dans les lits vasculaires périphériques [ 2].

Figure 1. Courbes de concentration-relaxation en réponse à la bradykinine sur un anneau d’artère coronaire isolée de chien. La bradykinine produit une relaxation dépendante de l’endothélium qui n’est que partiellement inhibée par la présence conjointe d’un inhibiteur de cyclo-oxygénase (indométacine) et de NO-synthase (L-nitro-arginine). La composante de la relaxation qui subsiste en présence de ces deux inhibiteurs est attribuée à un mécanisme additionnel qui implique l’hyperpolarisation des cellules musculaires lisses (EDHF, endothelium-derived hyperpolarizing factor).

Figure 1. Courbes de concentration-relaxation en réponse à la bradykinine sur un anneau d’artère coronaire isolée de chien. La bradykinine produit une relaxation dépendante de l’endothélium qui n’est que partiellement inhibée par la présence conjointe d’un inhibiteur de cyclo-oxygénase (indométacine) et de NO-synthase (L-nitro-arginine). La composante de la relaxation qui subsiste en présence de ces deux inhibiteurs est attribuée à un mécanisme additionnel qui implique l’hyperpolarisation des cellules musculaires lisses (EDHF, endothelium-derived hyperpolarizing factor).

La stimulation des récepteurs endothéliaux de l’acétylcholine, de la bradykinine ou de la substance P provoque une augmentation du calcium intracellulaire ([Ca]i) due à la fois à une libération de calcium des stocks internes et à une entrée de calcium externe grâce à l’ouverture de conductances cationiques (les cellules endothéliales n’exprimant pas les canaux calciques dépendants du potentiel). Les relaxations dépendantes de l’endothélium produites par la prostacycline ou le NO sont étroitement corrélées aux variations de [Ca]i de la cellule endothéliale [ 3]. Il en est de même pour les hyperpolarisations, dépendantes de l’endothélium, résistantes aux inhibiteurs de cyclo-oxygénase et de NO-synthase [ 4]. Ces hyperpolarisations sont inhibées par une augmentation de la concentration de potassium extracellulaire et par des inhibiteurs des canaux potassiques. Il a donc tout d’abord été suggéré que ces hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium impliquaient un troisième facteur également sécrété par les cellules endothéliales en réponse à une élévation de [Ca]i. Ce facteur non identifié appelé EDHF (endothelium-derived hyperpolarizing factor) était supposé diffuser vers les cellules musculaires lisses sous-jacentes et activer leurs canaux potassiques [ 5]. Cependant, cette hypothèse a été battue en brèche par de récentes observations.

EDHF et canaux potassiques activés par le calcium

Les réponses attribuées à l’EDHF sont bloquées de façon spécifique par l’association de deux toxines provenant de venins de scorpion et d’abeille, respectivement la charybdotoxine et l’apamine [ 6, 7] (Figure 2). L’apamine bloque spécifiquement un canal potassique de faible conductance dépendant du calcium (SKCa), alors que la charybdotoxine est un inhibiteur moins spécifique qui inhibe différents canaux potassiques, y compris des canaux dépendants du calcium de grande conductance (BKCa) et de conductance intermédiaire (IKCa). Or une autre toxine de scorpion, l’ibériotoxine, inhibiteur spécifique des BKCa, ne reproduit pas, dans la plupart des études in vitro, l’effet de la charybdotoxine [ 8, 9], indiquant que les BKCa ne sont certainement pas impliqués dans la majorité des réponses attribuées à l’EDHF.

Figure 2. Cellules musculaires lisses : enregistrement du potentiel de membrane et effet d’inhibiteurs des canaux potassiques. Le potentiel de membrane est enregistré dans une cellule musculaire lisse d’un segment d’artère carotide de cobaye pourvue de son endothélium. L’acétylcholine produit une hyperpolarisation de la cellule musculaire lisse si et seulement si l’endothélium est présent (A). Cette hyperpolarisation persiste en présence d’un inhibiteur de cyclo-oxygénase (indométacine) et de NO-synthase (L-nitro-arginine) (non montré sur cette figure). L’apamine (B), un inhibiteur spécifique d’un canal potassique dépendant du calcium de faible conductance (SKCa), et la charybdotoxine (C), un inhibiteur moins spécifique de différents canaux potassiques, y compris des canaux de conductance intermédiaire dépendants du calcium (IKCa), n’ont aucun effet lorsqu’ils sont administrés seuls. Cependant la combinaison de ces deux toxines (D) abolit l’hyperpolarisation dépendante de l’endothélium (d’après [7]).

Figure 2. Cellules musculaires lisses : enregistrement du potentiel de membrane et effet d’inhibiteurs des canaux potassiques. Le potentiel de membrane est enregistré dans une cellule musculaire lisse d’un segment d’artère carotide de cobaye pourvue de son endothélium. L’acétylcholine produit une hyperpolarisation de la cellule musculaire lisse si et seulement si l’endothélium est présent (A). Cette hyperpolarisation persiste en présence d’un inhibiteur de cyclo-oxygénase (indométacine) et de NO-synthase (L-nitro-arginine) (non montré sur cette figure). L’apamine (B), un inhibiteur spécifique d’un canal potassique dépendant du calcium de faible conductance (SKCa), et la charybdotoxine (C), un inhibiteur moins spécifique de différents canaux potassiques, y compris des canaux de conductance intermédiaire dépendants du calcium (IKCa), n’ont aucun effet lorsqu’ils sont administrés seuls. Cependant la combinaison de ces deux toxines (D) abolit l’hyperpolarisation dépendante de l’endothélium (d’après [7]).

Localisation des canaux potassiques SKCa et IKCa : les cellules endothéliales

Les cellules musculaires lisses vasculaires, dans leur phénotype contractile, expriment les BKCa, mais elles expriment peu ou pas les SKCa ou les IKCa. À l’inverse, des cellules endothéliales fraîchement dissociées expriment les SKCa et les IKCa, mais peu ou pas les BKCa [ 10– 12]. Ces observations suggèrent que les cibles des deux toxines sont situées sur les cellules endothéliales et non sur les cellules musculaires lisses. Cette hypothèse a été étayée par plusieurs observations. L’activation de récepteurs endothéliaux produit une augmentation de [Ca]i dans les cellules endothéliales, qui elle-même entraîne l’activation des canaux IKCa et SKCa sensibles, respectivement, à la charybdotoxine et l’apamine (Figure 3). Il en résulte une hyperpolarisation de la cellule endothéliale, qui est bloquée par la combinaison de ces deux toxines [ 11– 14]. Le décours temporel de l’hyperpolarisation des cellules endothéliales et des cellules musculaires lisses est identique [ 15]. Dans un vaisseau perfusé, le traitement associant les deux toxines est efficace si l’administration est effectuée dans la lumière du vaisseau (les toxines sont en contact avec les cellules endothéliales), mais demeure inefficace si l’administration est effectuée dans le liquide baignant l’extérieur du vaisseau (les toxines sont en contact avec la face adventitielle du vaisseau et ont donc pour cible prioritaire les cellules musculaires lisses) [ 16]. Au total, l’activation des canaux endothéliaux SKCa et IKCa et, en conséquence, l’hyperpolarisation des cellules endothéliales sont requises pour observer une hyperpolarisation des cellules musculaires lisses. 

Figure 3. Cellules endothéliales : enregistrement des courants potassiques et effet des inhibiteurs de canaux potassiques. Les cellules endothéliales sont fraîchement isolées d’artère coronaire de porc et leurs canaux potassiques sont étudiés par la méthode de patch-clamp (configuration : patch perforé). La substance P (SP), la charybdotoxine (ChTX, inhibiteur de différents canaux potassiques, y compris des canaux de conductance intermédiaire dépendants du calcium, IKCa), l’ibériotoxine (IbTX, inhibiteur spécifique des canaux de large conductance dépendants du calcium, BKCa) et l’apamine (Apam, inhibiteur spécifique d’un canal potassique de faible conductance, dépendant du calcium, SKCa) ont été étudiées à la concentration de 100 nM. La substance P provoque une augmentation du courant potassique sortant provoqué par des sauts successifs de potentiel (A-C). Individuellement, l’apamine (A) et la chaybdotoxine (B) inhibent partiellement, mais significativement (*), l’augmentation du courant potassique sortant provoquée par la substance P. L’ibériotoxine (C), à l’inverse, ne provoque pas d’inhibition significative. L’association de la charybdotoxine et de l’apamine abolit les effets de la substance P sur le courant potassique sortant (non montré sur ce graphe) (d’après [11, 12]).

Figure 3. Cellules endothéliales : enregistrement des courants potassiques et effet des inhibiteurs de canaux potassiques. Les cellules endothéliales sont fraîchement isolées d’artère coronaire de porc et leurs canaux potassiques sont étudiés par la méthode de patch-clamp (configuration : patch perforé). La substance P (SP), la charybdotoxine (ChTX, inhibiteur de différents canaux potassiques, y compris des canaux de conductance intermédiaire dépendants du calcium, IKCa), l’ibériotoxine (IbTX, inhibiteur spécifique des canaux de large conductance dépendants du calcium, BKCa) et l’apamine (Apam, inhibiteur spécifique d’un canal potassique de faible conductance, dépendant du calcium, SKCa) ont été étudiées à la concentration de 100 nM. La substance P provoque une augmentation du courant potassique sortant provoqué par des sauts successifs de potentiel (A-C). Individuellement, l’apamine (A) et la chaybdotoxine (B) inhibent partiellement, mais significativement (*), l’augmentation du courant potassique sortant provoquée par la substance P. L’ibériotoxine (C), à l’inverse, ne provoque pas d’inhibition significative. L’association de la charybdotoxine et de l’apamine abolit les effets de la substance P sur le courant potassique sortant (non montré sur ce graphe) (d’après [11, 12]).

Pour rendre compte de la transmission de l’hyperpolarisation endothéliale vers les cellules musculaires lisses, plusieurs hypothèses ont été évoquées (pour revue, voir [5]). Les principales font appel à la transmission au travers de jonctions de type communicantes (gap junctions), à la fuite et l’accumulation de potassium dans l’espace intercellulaire, et à la production d’acides époxyeicosatriénoïques (EET), métabolites instables de l’acide arachidonique produits par une cytochrome P450 mono-oxygénase.

Une hypothèse fédératrice

Les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium ne proviennent pas nécessairement d’une multitude de réponses différentes variant au gré de l’espèce, du tissu ou des conditions expérimentales. Un modèle fédérateur (Figure 4) a pu être proposé [2].

Figure 4. Une hypothèse fédératrice pour expliquer les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium. Dans les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium, l’événement premier est l’augmentation du [Ca]i au sein des cellules endothéliales, suivi de l’activation des conductances potassiques endothéliales (SKCa et IKCa) et de l’hyperpolarisation de la cellule endothéliale. Cette hyperpolarisation peut se propager vers les cellules musculaires lisses de manière électrotonique via les jonctions communicantes myoendothéliales. Cependant, l’ouverture des canaux potassiques endothéliaux a pour conséquence immédiate la fuite de potassium et l’accumulation de celui-ci dans l’espace intercellulaire, phénomène qui peut également hyperpolariser les cellules musculaires lisses en activant une conductance potassique rectifiant dans le sens entrant (KIR) et/ou certaines isoformes de la pompe Na+,K+-ATPase. Dans les gros troncs coronaires, la réponse endothéliale est sous la dépendance de la cytochrome P450 mono-oxygénase. Dans ces conditions, les acides époxyeicosatriénoïques (EET) sont des messagers intracellulaires endothéliaux pouvant contrôler la libération de calcium des stocks intracellulaires (1), les conductances potassiques (2) et la perméabilité des gap junctions (3). La libération dans le milieu extracellulaire de ces EET ne doit pas être exclue (4) et, lorsqu’elle se produit, les EET activent des canaux BKCa situés sur les cellules musculaires lisses. A23187 : ionophore calcique ; AA : acide arachidonique ; ACh : acétylcholine ; BK : bradykinine ; DAG : diacyl-glycérol ; EET : acide époxyeicosatriénoïque ; IP3 : inositol trisphosphate ; P450 : cytochrome P450 mono-oxygénase ; PLC : phospholipase C ; R : récepteur ; SP : substance P. L’ibériotoxine (IbTX) est un inhibiteur spécifique des BKCa. La charybdotoxine (ChTX) est un inhibiteur des BKCa, des IKCa et de certains canaux potassiques dépendants du potentiel. L’apamine est un inhibiteur spécifique des SKCa. L’1-éthyl-2-benzimidazolinone (1-EBIO) ouvre les canaux IKCa. L’ouabaïne, à des concentrations submicromolaires, est un inhibiteur de la Na+,K+-ATPase. Le baryum (Ba2+), à des concentrations millimolaires, est un inhibiteur relativement spécifique des canaux KIR. Le Gap27, un peptide de 11 acides aminés possédant une homologie de séquence avec une portion de la seconde boucle extracellulaire d’une connexine, le 18a-glycyrrhetinic acid (aGA), ainsi que l’heptanol sont des inhibiteurs de gap junctions (d’après [ 44]).

Figure 4. Une hypothèse fédératrice pour expliquer les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium. Dans les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium, l’événement premier est l’augmentation du [Ca]i au sein des cellules endothéliales, suivi de l’activation des conductances potassiques endothéliales (SKCa et IKCa) et de l’hyperpolarisation de la cellule endothéliale. Cette hyperpolarisation peut se propager vers les cellules musculaires lisses de manière électrotonique via les jonctions communicantes myoendothéliales. Cependant, l’ouverture des canaux potassiques endothéliaux a pour conséquence immédiate la fuite de potassium et l’accumulation de celui-ci dans l’espace intercellulaire, phénomène qui peut également hyperpolariser les cellules musculaires lisses en activant une conductance potassique rectifiant dans le sens entrant (KIR) et/ou certaines isoformes de la pompe Na+,K+-ATPase. Dans les gros troncs coronaires, la réponse endothéliale est sous la dépendance de la cytochrome P450 mono-oxygénase. Dans ces conditions, les acides époxyeicosatriénoïques (EET) sont des messagers intracellulaires endothéliaux pouvant contrôler la libération de calcium des stocks intracellulaires (1), les conductances potassiques (2) et la perméabilité des gap junctions (3). La libération dans le milieu extracellulaire de ces EET ne doit pas être exclue (4) et, lorsqu’elle se produit, les EET activent des canaux BKCa situés sur les cellules musculaires lisses. A23187 : ionophore calcique ; AA : acide arachidonique ; ACh : acétylcholine ; BK : bradykinine ; DAG : diacyl-glycérol ; EET : acide époxyeicosatriénoïque ; IP3 : inositol trisphosphate ; P450 : cytochrome P450 mono-oxygénase ; PLC : phospholipase C ; R : récepteur ; SP : substance P. L’ibériotoxine (IbTX) est un inhibiteur spécifique des BKCa. La charybdotoxine (ChTX) est un inhibiteur des BKCa, des IKCa et de certains canaux potassiques dépendants du potentiel. L’apamine est un inhibiteur spécifique des SKCa. L’1-éthyl-2-benzimidazolinone (1-EBIO) ouvre les canaux IKCa. L’ouabaïne, à des concentrations submicromolaires, est un inhibiteur de la Na+,K+-ATPase. Le baryum (Ba2+), à des concentrations millimolaires, est un inhibiteur relativement spécifique des canaux KIR. Le Gap27, un peptide de 11 acides aminés possédant une homologie de séquence avec une portion de la seconde boucle extracellulaire d’une connexine, le 18a-glycyrrhetinic acid (aGA), ainsi que l’heptanol sont des inhibiteurs de gap junctions (d’après [ 44]).

L’événement premier et commun correspond à l’augmentation de [Ca]i au sein des cellules endothéliales, suivi par l’activation des conductances potassiques et par l’hyperpolarisation de ces cellules. Dans les gros troncs coronaires, cette réponse endothéliale est sous la dépendance de l’activité de la cytochrome P450 mono-oxygénase ; les EET sont des messagers intracellulaires endothéliaux pouvant régler l’homéostasie calcique [ 28], les conductances potassiques [ 29] et la perméabilité des gap junctions [ 30]. La libération dans le milieu extracellulaire de ces EET ne doit pas être exclue, mais elle ne se produirait que dans certaines circonstances, par exemple en réponse à un stimulus agressif [ 31]. L’hyperpolarisation de la cellule endothéliale peut se propager de manière électrotonique via les gap junctions. Cependant, l’ouverture des canaux potassiques endothéliaux a pour conséquence immédiate la fuite de potassium et l’accumulation de celui-ci dans l’espace intercellulaire, phénomène qui peut également hyperpolariser les cellules musculaires lisses. Ces divers mécanismes ne sont pas nécessairement exclusifs, ils peuvent se produire simultanément, être additifs, voire synergiques. La prépondérance de l’un ou l’autre de ces mécanismes dans les réponses attribuées à l’EDHF dépendra du degré d’expression des protéines impliquées et des caractéristiques intrinsèques de ces protéines. Par exemple, pour que l’accumulation de potassium dans le milieu extracellulaire puisse hyperpolariser le muscle lisse vasculaire sous-jacent, il est nécessaire que les canaux KIR et/ou que les isoformes appropriées de la pompe Na+,K+-ATPase soient présents et fonctionnels dans ces cellules musculaires [ 32– 34] (voir Encadré).

Accumulation de potassium et hyperpolarisation Il pourrait paraître illogique qu’une augmentation de la concentration extracellulaire de potassium puisse provoquer l’hyperpolarisation des cellules musculaires lisses et/ou endothéliales si l’on suit la règle de la loi de Nernst. En fait, la pompe Na+,K+-ATPase est activée par le potassium extracellulaire. La Na+,K+-ATPase étant électrogénique, son activation produit une hyperpolarisation. Les différentes isoformes de la Na+,K+-ATPase exprimées dans le muscle lisse (ou l’endothélium) n’ont pas la même sensibilité vis-à-vis du potassium externe. L’isoforme contenant la sous-unité a1, exprimée de façon ubiquitaire, est généralement complètement activée pour des concentrations physiologiques de potassium (~5 mM). En revanche, les isoformes contenant les sous-unités a2 ou a3, (exprimées dans le muscle lisse de l’artère mésentérique de rat, un vaisseau où la réponse EDHF implique le potassium, [32]) sont activées pour des concentration de potassium plus élevées (jusqu’à 15–20 mM). Une augmentation de la concentration en potassium extracellulaire peut également conduire à une hyperpolarisation par l’activation du canal potassique rectifiant dans le sens entrant (KIR). Ce canal, activé par le potassium extracellulaire, a la particularité de présenter une courbe courant-potentiel en forme de N. Ce courant n’est sortant que dans une fenêtre étroite de potentiel, située entre environ – 50 mV (le potentiel de repos pour les cellules musculaires lisses et endothéliales) et – 20 mV. Lorsque ce canal est activé, dans cette fenêtre de potentiel, il produit une hyperpolarisation de la cellule considérée. Ce canal potassique est exprimé par les cellules endothéliales et les cellules musculaires lisses des petites artères de résistance (diamètre < 300 mm) [14, 33– 35]. L’activation de la pompe Na+,K+-ATPase et/ou de KIR, par une augmentation modérée de la concentration en potassium extracellulaire, compense largement la faible dépolarisation que l’on pourrait attendre en suivant l’équation de Nernst.

Les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium sont associées à des relaxations du muscle lisse vasculaire. En théorie, l’hyperpolarisation du muscle lisse vasculaire engendre une relaxation en diminuant la [Ca]i. Deux mécanismes sont impliqués : d’une part la diminution de la probabilité d’ouverture des canaux calciques dépendants du potentiel qui réduira l’entrée de calcium et, d’autre part, la diminution de la production de phosphatidylinositol intracellulaire qui réduira la libération de calcium des sites de stockage intracellulaire [35]. Dans les vaisseaux sanguins de différentes espèces, y compris chez l’homme, parmi les mécanismes impliqués dans les relaxations dépendantes de l’endothélium, la contribution de l’EDHF devient de plus en plus prépondérante au fur et à mesure que le diamètre artériel décroît [ 36, 37]. Chez la souris, les vasodilatations attribuées à l’EDHF sont au moins aussi importantes que celles produites par le NO endothélial, puisque ni la délétion du gène de la NO-synthase endothéliale, ni l’inhibition des NO-synthases n’atténuent l’hypotension (Figure 5) ou les vasodilatations produites par l’administration d’acétylcholine ou de bradykinine [ 38]. Chez le rat anesthésié, l’application locale de la combinaison des deux toxines, charybdotoxine et apamine, ne produit pas d’effet sur les résistances basales de divers lits vasculaires périphériques (mésentérique et train arrière), mais inhibe partiellement l’augmentation de conductance produite par l’acétylcholine [ 39]. Toutes ces données indiquent que, si l’EDHF joue un rôle modeste dans la régulation des conductance basales, il contribue à la régulation locale des résistances périphériques vasculaires et donc à la répartition du flux sanguin en réponse à divers messagers neurohumoraux.

Figure 5. Pression artérielle chez des souris anesthésiées déficientes pour la forme endothéliale de la NO-synthase [eNOS−/−] et les souris sauvages (C57BL6). A. Tracé original montrant les effets d’une administration intraveineuse en bolus de bradykinine (10 µg/kg) sur la pression artérielle (PA) d’une souris eNOS−/− préalablement traitée avec un inhibiteur de cyclo-oxygénase, le diclofénac (10 mg/kg, i.p.) et un inhibiteur de NO-synthase, l’ester méthylé de la L-nitro-arginine (L-NAME, 30 mg/kg, i.p.). B. Effet de l’administration, sous forme de bolus, de sérum physiologique (colonne orange) ou de bradykinine (1, 10 et 30 µg/kg, respectivement pour les colonnes vertes, rouges et bleues) sur la pression artérielle moyenne en l’absence (témoin), ou en présence de diclofénac et de L-NAME. La chute de pression provoquée par l’administration de bradykinine n’est pas différente entre les souris eNOS−/− traitées et celles non traitées par des inhibiteurs de cyclo-oxygénase de NO-synthase, ce qui montre que la voie de l’EDHF joue un rôle majeur dans le contrôle local du débit sanguin (d’après [38]).

Figure 5. Pression artérielle chez des souris anesthésiées déficientes pour la forme endothéliale de la NO-synthase [eNOS−/−] et les souris sauvages (C57BL6). A. Tracé original montrant les effets d’une administration intraveineuse en bolus de bradykinine (10 µg/kg) sur la pression artérielle (PA) d’une souris eNOS−/− préalablement traitée avec un inhibiteur de cyclo-oxygénase, le diclofénac (10 mg/kg, i.p.) et un inhibiteur de NO-synthase, l’ester méthylé de la L-nitro-arginine (L-NAME, 30 mg/kg, i.p.). B. Effet de l’administration, sous forme de bolus, de sérum physiologique (colonne orange) ou de bradykinine (1, 10 et 30 µg/kg, respectivement pour les colonnes vertes, rouges et bleues) sur la pression artérielle moyenne en l’absence (témoin), ou en présence de diclofénac et de L-NAME. La chute de pression provoquée par l’administration de bradykinine n’est pas différente entre les souris eNOS−/− traitées et celles non traitées par des inhibiteurs de cyclo-oxygénase de NO-synthase, ce qui montre que la voie de l’EDHF joue un rôle majeur dans le contrôle local du débit sanguin (d’après [38]).

Des altérations de la voie de l’EDHF ont été montrées tant chez l’homme que chez l’animal. Ainsi, le vieillissement (Figure 6), l’hypercholestérolémie, l’hypertension artérielle essentielle ainsi que l’éclampsie gravidique diminuent les réponses attribuées à l’EDHF dans les artères humaines. De plus, ces réponses sont également altérées chez l’animal dans divers modèles d’hypertension, de diabète, d’athérosclérose ou de choc septique [37, 40–44]. À l’inverse, les réponses attribuées à l’EDHF peuvent exercer un rôle compensateur quand la voie de la NO-synthase est altérée chez les patients hypertendus [ 45] ou dans des modèles animaux de dénudation et de régénération endothéliale [ 46].

L’amélioration des réponses attribuées à l’EDHF peut contribuer à la restauration de la fonction endothéliale lors de différentes interventions thérapeutiques. Les inhibiteurs de l’enzyme de conversion de l’angiotensine (Figure 6), les antagonistes des récepteurs AT1 de l’angiotensine ou les œstrogènes augmentent les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium. Il est intéressant de noter que cet effet des œstrogènes a été associé chez le rat à une augmentation de l’expression de la connexine 43, qui est exprimée par les cellules endothéliales et musculaires lisses, suggérant une implication des gap junctions, et potentiellement une augmentation des jonctions myoendothéliales dans l’effet bénéfique des œstrogènes [ 41–44].

Figure 6. Effet de l’âge, des pathologies ischémiques myocardiques ainsi que de l’inhibition de l’enzyme de conversion de l’angiotensine sur les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium de l’artère coronaire humaine. Le potentiel de membrane des cellules musculaires lisses de segments d’artères coronaires humaines isolées, pourvues ou non de leur endothélium, a été enregistré à l’aide de microélectrodes intracellulaires. Les expériences ont été réalisées en présence des inhibiteurs de cyclo-oxygénase (indométacine, 10–5 M) et de NO-synthase (L-nitro-arginine, 10–4 M). A. Les enregistrements ont été réalisés sur des artères coronaires de deux patients a priori non porteurs de maladies coronariennes et âgées respectivement de 15 mois et de 64 ans. L’application de bradykinine (10–7 M) produit une hyperpolarisation des cellules musculaires lisses qui dépend de l’endothélium et qui est nettement diminuée dans l’artère coronaire du sujet âgé. B. Les enregistrements ont été obtenus sur un même segment d’artère coronaire provenant d’un patient souffrant d’ischémie myocardique âgé de 68 ans. Alors que l’application de bradykinine (10–8 M) ne produit aucune hyperpolarisation dépendante de l’endothélium (témoin), une pré-incubation de 30 min avec du périndoprilate (10–6 M), un inhibiteur de l’enzyme de conversion de l’angiotensine (IECA), restaure une hyperpolarisation dépendante de l’endothélium en réponse à une seconde application de bradykinine (d’après [40, 42]).

Figure 6. Effet de l’âge, des pathologies ischémiques myocardiques ainsi que de l’inhibition de l’enzyme de conversion de l’angiotensine sur les hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium de l’artère coronaire humaine. Le potentiel de membrane des cellules musculaires lisses de segments d’artères coronaires humaines isolées, pourvues ou non de leur endothélium, a été enregistré à l’aide de microélectrodes intracellulaires. Les expériences ont été réalisées en présence des inhibiteurs de cyclo-oxygénase (indométacine, 10–5 M) et de NO-synthase (L-nitro-arginine, 10–4 M). A. Les enregistrements ont été réalisés sur des artères coronaires de deux patients a priori non porteurs de maladies coronariennes et âgées respectivement de 15 mois et de 64 ans. L’application de bradykinine (10–7 M) produit une hyperpolarisation des cellules musculaires lisses qui dépend de l’endothélium et qui est nettement diminuée dans l’artère coronaire du sujet âgé. B. Les enregistrements ont été obtenus sur un même segment d’artère coronaire provenant d’un patient souffrant d’ischémie myocardique âgé de 68 ans. Alors que l’application de bradykinine (10–8 M) ne produit aucune hyperpolarisation dépendante de l’endothélium (témoin), une pré-incubation de 30 min avec du périndoprilate (10–6 M), un inhibiteur de l’enzyme de conversion de l’angiotensine (IECA), restaure une hyperpolarisation dépendante de l’endothélium en réponse à une seconde application de bradykinine (d’après [40, 42]).

Le mécanisme des hyperpolarisations dépendantes de l’endothélium commence à être mieux compris. Des toxines ont été identifiées et utilisées pour bloquer de façon sélective cette voie. Ces outils sont cependant encore imparfaits et ne permettent pas de façon aisée une exploration fonctionnelle chez l’animal, ni bien entendu chez l’homme. Cependant, plus nos connaissances progressent et plus il apparaît que les réponses attribuées à l’EDHF jouent un rôle physiologique majeur dans le contrôle local du débit sanguin.