2008
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Annexes
Annexe 1
Prélèvements en vue des études biologiques et génétiques
Études biologiques
Tissus cérébraux*
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Paramètres
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Quanti té (mg)
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Méthodologie
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Sites de recherche Coûts
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|---|---|---|---|
|
Récepteurs
| |||
|
5-HT1A
|
100
|
Binding
|
HAMON M
|
|
5-HT2A
|
100
|
Binding
|
Inserm U 677
|
|
5-HT2C
|
100
|
Binding
|
CHU Pitié-Salpêtrière, Paris
|
|
5-HT3
|
100
|
Binding
| |
|
5-HT7
|
50-100
|
ARNm
(HIS, qRT-PCR) | |
|
Transporteurs
| |||
|
5-HTT, NAT, DAT
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100 x 3
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Binding
|
MAROTEAUX L, GASPAR P
Inserm U 616
Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris
500 € x 3 paramètres = 1 500 €
|
|
5-HTT, NAT, DAT, GluT
|
100
|
Immuno-localisation
|
MAROTEAUX L, GASPAR P
|
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VMATs (vésiculaires) (amygdale, hippocampe, nucleus accumbens, cortex frontal)
|
Immuno-localisation
|
Inserm U 616
Hôpital Pitié-Salpêtrière, Paris
400 € x 5 paramètres = 2 000 €
|
|
|
Enzymes
| |||
|
MAO A
|
100
|
Activité enzymatique
|
Pr PARINI A
Inserm U 388, Toulouse
|
|
MAO B
|
Quantification ARNm
|
Pr PARINI A
Inserm U 388, Toulouse
|
|
|
COMT
(nucleus accumbens, striatum, substance noire pars compacta) |
50
|
Activité enzymatique
|
Pr COSTENTIN J
Pharmacologie
CHU, Rouen
40 € par échantillon
|
|
Couplage protéines G
| |||
|
[35S]GTP-gamma-S
|
50
|
Autoradiographie
|
HAMON M
Inserm U 677
CHU Pitié-Salpêtrière, Paris
|
|
Neurotransmetteurs
| |||
|
Kynurénine-tryptophane (IDO)
|
20
|
CLHP-EC
|
SPREUX-VAROQUAUX O, MANEGLIER B
|
|
5-HT, 5-HIAA, DA, DOPAC-3-OMD, HVA
|
100
|
CLHP-EC
|
Pharmacologie PIFO
|
|
Glutamate/GABA
|
100
|
CLHP-EC
|
Hôpital de Versailles, Le Chesnay
40 € x 3 paramètres = 120 €
|
* Raphé, nucleus accumbens, hippocampe, amygdale, hypothalamus, striatum, cortex pré frontal médian, cortex orbito-préfrontal, cortex préfrontal dorsolatéral, cervelet, substance noire pars compacta
5-HT : 5-hydroxytryptamine ou sérotonine ; NA : Noradrénaline ; DA : Dopamine ; MAO : Monoamine oxydase ; VMAT : Trans porteurs vésiculaires des monoamines ; COMT : Catéchol-O-méthyltransfé rase ; 5-HIAA : Acide 5 hydroxy-indolacétique ; DOPAC : Acide dihydroxyphénylacétique ; 3-OMD : 3-O-méthyldopamine ou 3-méthoxytyramine ; HVA : Acide homovanillique ; IDO : Indola mine-2,3-dioxygénase ; GABA : Acide gamma-aminobutyrique
PIFO : Faculté de Médecine Paris-Ile de France-Ouest, Université de Versailles, St Quentin en Yvelines (UVSQ) ; HIS : Hybridation in situ ; qRT-PCR : Quantitative Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction ; CLHP-EC : Chromatographie liquide à haute performance avec détection électrochimique
Autres milieux biologiques
|
Paramètres
|
Quantité
|
Méthodologie
|
Sites de recherche Coûts
|
|---|---|---|---|
|
Liquide céphalo-rachidien
|
1-3 ml
| ||
|
5-HIAA, HVA
|
CLHP-EC
|
SPREUX-VAROQUAUX O
|
|
|
5-HT
|
CLHP-EC
|
Pharmacologie PIFO
Hôpital de Versailles, Le chesnay
40 € x 2 paramètres = 80 €
|
|
|
Sang
|
17 à 27 ml
| ||
|
5-HT plaquettaire
|
1 ml
|
CLHP-EC
|
SPREUX-VAROQUAUX O, MANEGLIER B
|
|
Kynurénine/
Tryptophane (IDO) |
1 ml (100 ml plasma)
|
CLHP-EC
|
Pharmacologie PIFO
|
|
5-HIAA, HVA
|
2 ml (500 ml plasma)
|
CLHP-EC
|
Hôpital de Versailles, Le Chesnay
|
|
Cotinine
|
3 ml (1 ml plasma)
|
CLHP-UV
|
40 € x 4 paramètres = 160 €
|
|
Médicaments
psychotropes, stupéfiants et éthanol |
10 à 20 ml
|
LC-MS/MS, GC/
MS et LC/ BD |
ALVAREZ JC
Pharmacologie PIFO Hôpital Raymond Poincaré Garches B 900 = B 800 = B 120 (B = 0,27 €) |
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Urines
|
10-20 ml
| ||
|
5-HT
|
500 ml
|
CLHP-EC
|
SPREUX-VAROQUAUX O
Pharmacologie PIFO
Hôpital de Versailles,
Le Chesnay
40 € x 5 paramètres = 200 €
|
|
5-HIAA, HVA
|
250 ml
|
CLHP-EC
|
|
|
Catécholamines (A+NA+DA)
|
5 ml (3 ml dosage)
|
CLHP-EC
|
|
|
Métanéphrines + 3-OMD (COMT)
|
3 ml (2 ml dosage)
|
CLHP-EC
|
|
|
PEA
|
2 ml (1 ml dosage)
|
CLHP-F
|
|
|
Cheveux
| |||
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Stupéfiants/
benzodiazépines/ antidépresseurs |
3 mèches de l’épaisseur d’un crayon coupées au ras du cuir chevelu (dernier mois) et attachées côté racine avec une corde lette
|
LC-MS/MS (bzp)
GC/MS (stup)
|
ALVAREZ JC
Pharmacologie PIFO
Hôpital Raymond Poincaré
Garches
B 400 par substance
(opiacé, benzodiazé pine…)
|
|
Tissu adipeux
sous-cutané et interne | |||
|
MAO A
MAO B
SSAO
|
1 g de tissu adipeux sous-cutané pris dans la région abdominale à 10 cm environ de l’ombilic et à 1 cm de profondeur (ne prélever que du tissu jaune d’aspect très gras, peu conjonctif, et éviter de mettre de la peau)
Si possible, prélever également environ 1 gramme de tissu intra-abdominal, soit près du tube digestif soit près du rein
|
Activité
enzymatique |
CARPENE C
Inserm U 586
Toulouse
100 € par individu (3 mesures)
|
5-HT : 5-hydroxytryptamine ou sérotonine ; A : Adrénaline ; NA : Noradrénaline ; DA : Dopamine ; MAO : Monoamine oxydase ; COMT : Catéchol-O-méthyltransfé rase ; 5-HIAA : Acide 5 hydroxy-indolacétique ; 3-OMD : 3-O-méthyldopamine ou 3-méthoxytyramine ; HVA : Acide homo vanillique ; IDO : Indolamine-2,3-dioxygénase ; PEA : Phényléthyla mine ; SSAO : Semicarbazide-sensitive amine oxidase PIFO : Faculté de Médecine Paris-Ile de France-Ouest, Université de Versailles, St Quentin en Yvelines (UVSQ) ; HIS : Hybridation in situ ; CLHP : Chromatographie liquide à haute performance ; CLHP-EC : Chromatographie liquide à haute performance avec détection électrochimique ; CLHP-UV : Chro matographie liquide à haute performance avec détection ultra-violet ; CLHP-F : Détection en fluores cence ; GC/MS : Chromatographie gazeuse couplée à la spectrométrie de masse ; LC-BD : Chromatographie en phase liquide couplée à une détection par barrette de diodes ; LC-MS/MS : Chromatographie liquide couplée à un spectromètre de masse en tandem
Études génétiques
Constitution de banque d’ADN en vue d’analyses de gènes candidats
Études du profil d’expression (ARN) de gènes candidats
dans les tissus cérébraux
Annexe 2
Intérêt de certains paramètres neurobiologiques
Analyse des récepteurs couplés à des protéines G
par la liaison de [35S]GTP-gamma-S
Activité de l’indolamine-2,3-dioxygénase (IDO) par dosage
simultané de kynurénine et tryptophane
).
). Elle joue également un rôle prépondérant dans les phénomènes d’immunotolérance comme la tolérance materno-fœtale. L’activation de la voie des kynurénines permet de limiter localement la prolifération des lymphocytes T régulant ainsi la réponse immunitaire associée. L’activation de cette voie entraîne une consommation locale du tryptophane biodisponible limitant ainsi la synthèse protéique des lymphocytes T et engendre la production de divers catabolites, dont la kynurénine (Grohmann et coll., 2003
). Certains de ces intermédiaires stimulent l’apoptose des lymphocytes T. Cependant, d’autres catabolites, principalement l’acide quinolinique (puissant agoniste des récepteurs N-méthyl-D-aspartate ou NMDA) sont connus pour être de puissants neurotoxiques (Guillemin et coll., 2005a
).
et 2005b
). De par leurs propriétés immunomodulatrices et antivirales, les IFNs de type I, principalement les IFN-α, sont largement utilisés en clinique (hépatite B et hépatite C chronique). Cependant, l’utilisation clinique d’IFN-α engendre de nombreux effets secondaires (Manns et coll., 2001
; Fried et coll., 2002
). Après deux mois de traitement, il est décrit chez près de 30 % des patients des troubles neuropsychiatriques pouvant aboutir à des tentatives de suicide (Anisman et coll., 2002
; Asnis et coll., 2003
). Les origines biologiques de ces phénomènes dépressifs induits par les IFNs ne sont pas clairement définies, mais il semble de plus en plus établi que participerait une activation de l’IDO engendrant une modification du tryptophane biodisponible et/ou une production de métabolites neurotoxiques (Capuron et Ravaud, 1999
; Capuron et coll., 2003
; Capuron et Miller, 2004
; Wichers et coll., 2005
). De nombreuses équipes conseillent, préalablement à une mise sous IFN-α, une consultation avec un psychiatre ainsi qu’un traitement par IRS dans certains cas.Intérêt du dosage de phényléthylamine (PEA)
Bibliographie
Annexe 3
Liste des services de médecine légale pratiquant des examens post mortem
Lille
Institut de médecine légale et de médecine sociale
Amiens
Paris V – Ouest – Garches
Service anatomie et cytologie pathologiques - médecine légale
Paris XII
Institut de médecine légale de Paris
Évry
Reims
Service de médecine légale - Faculté de médecine
Nancy
Service de médecine légale et droit de la santé
Strasbourg
Institut de médecine légale
Besançon
Service de médecine légale
Dijon
Service de médecine légale
Lyon
Institut de médecine légale
Grenoble
Unité de médecine légale
Clermont-Ferrand
Institut régional de médecine légale
Saint-Étienne
Service de médecine légale
Tours
Institut médicolégal
Limoges
Laboratoire de médecine légale
Toulouse
Service médecine légale
Montpellier
Service de médecine légale
Marseille
Service de médecine légale
Nice
Laboratoire de médecine légale et Anthropologie médicolégale
Bordeaux
Laboratoire de médecine légale, éthique et droit médical
Poitiers
Service de médecine légale
Angers
Service de médecine légale
Rouen
Institut de médecine légale
Nantes
Laboratoire de médecine légale
Rennes
Laboratoire de médecine légale
Annexe 4
Évaluation budgétaire de l’étude au Nouveau-Brunswick
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Éléments du projet
|
Coût en dollars canadiens
|
Coût approximatif en euros**
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|---|---|---|
|
Coûts de personnel
| ||
|
Coordination de la recherche
|
52 000
|
35 000
|
|
Responsable du recrutement
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52 000
|
35 000
|
|
Assistant de recherche (soutien et supervision des interviewers, relecture des anamnèses…)
|
45 000
|
30 000
|
|
Interviewers : Une personne par région sanitaire, soit 7 régions
Chaque interviewer devra être libéré 10 à 12 heures par semaine
Charges des interviewers :
- réaliser la totalité des entrevues au domicile des familles ;
- faire un suivi téléphonique avec les personnes endeuillées suite aux entrevues ;
- assurer les interventions nécessaires si les personnes sont en détresse ;
- rédiger une anamnèse selon les critères de l’étude (symptomatologie pour les SCID I et II, trajectoire de vie et trajectoires des services reçus)
|
96 000
(Évaluation approximative)
|
64 000
|
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Membres du panel pour la recherche sur les services
Les membres (psychiatre, travailleuse communautaire, directrice du programme des soins aigus) devront être libérés environ 1 journée et demie par semaine
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150 000
(Évaluation approximative) |
100 000
|
|
Proxy* (pour groupe II : 30 cas)
|
30 000
|
20 000
|
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Entrée et analyses des données :
- entrée des données par une étudiante 1 jour/ semaine=5 500 $
- analyses des données (expertise) = 15 000 $
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20 500
|
13 500
|
|
Formation :
Formation à l’administration des questionnaires cliniques, rédaction de rapport, suivi et validation
|
5 000
|
3 300
|
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Coûts de fonctionnement
| ||
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Frais de déplacement (déplacement, hôtels...) :
- déplacements des chercheurs X 12 = 12 000 $
- déplacements des interviewers = 4 000 $
- déplacements pour la formation X 2 = 2 000 $
- déplacements du panel d’experts Montréal - Fredericton X 6 = 6 000 $
|
24 000
|
16 000
|
|
Autres dépenses
Téléphone, instruments de mesure, photocopies, enregistreuses, cassettes...
|
10 000
|
6 500
|
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Total coût (évaluation approximative)
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484 500
|
323 300
|
* Le « proxy » est un échantillon de comparaison qui permet une validation de la méthodologie. Comme la méthode d’autopsie psychologique est une investigation au sujet d’une personne décédée auprès de ses proches, la même méthode d’investigation est conservée pour le groupe témoin (groupe ayant fait une tentative de suicide sévère). Ce groupe témoin est alors utilisé comme mesure de validation en prenant un sous-échantillon (n=30), et en plus d’interroger les proches, la même investigation est réalisée auprès du sujet lui-même. Ceci permet de vérifier l’écart entre les données obtenues auprès des proches et celles obtenues auprès du sujet lui-même. ** Sur la base d’un Euro équivalant à 1,5 dollars canadiens.